AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA TANAMAN OBAT

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA TANAMAN OBATTRADISIONAL BALI DAN ISOLASI SENYAWATERPENOID DARI EKSTRAK METANOL DAUNPARE (Momordica charantia)Luh Lian Pertiwi (1414201038)Prof. Dr. Taslim ErsamSri Fatmawati, M.Sc.,Ph. DProgram PascasarjanaJurusan KimiaInstitut Teknologi Sepuluh NopemberSurabaya

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

Radikal BebasMerusak struktur dan fungsi ronerKebutaanStrokeGagal Ginjal

Antioksidan Efektifitasnya tinggiSintesisAntioksidan Senyawa bahan alampada tumbuhan (turunanAlamifenol, kumarin, flavonoid)Keanekaragaman Tumbuhan diIndonesia (Sumber Antioksidan Alami)

Indonesia merupakan negara kepulauan terbesar yang terdiri dari 17.508 pulaudengan keanekaragaman hayati tertinggi di Dunia.

SPA TRADISIONAL BALI

PURI PENGOBATAN TRADISIONALUSADHAIlmu pengobatantradisional Baliyang sumbernyaberasal dari LontarLontar RukminiTatwa

KeanekaragamanTanaman Obat BaliLontar Rukmini TatwaWawancaraMasyarakat Bali Utara13 Tanaman Obat Tradisional BaliDAUN PAREKubola (2008) ekstrak daun parememiliki aktivitas antioksidan (DPPH)IC50 9,72 μg/mLABTS?Aktivitas antioksidan ekstrak daun pare terhadap ABTS?Dari ekstrak yang aktif antioksidan apakah masih berpeluangditemukan senyawa baru dan aktif antioksidan?

TujuanPenelitianUntuk mendapatkan nilai aktivitas antioksidan daun pare terhadapABTS dan mendapatkan senyawa baru dan aktif antioksidan.ManfaatMemberikan bukti ilmiah tentang pengobatan dengan menggunakantanaman obat tradisional. Potensi tanaman obat tradisional Bali dapatmenjadi salah satu pengobatan alternatif yang diharapkan mampumenarik minat wisatawan.Potensi tanaman tradisional sebagai agen antioksidan ini diharapkandapat memberikan peluang baru penemuan sebagai obat yang efektifdan aman serta terjangkau oleh semua masyarakat Indonesia.

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

Serbuk TS55,665DPPH52,2330,69789,93983,188PGCPEkstrak 5,59202040608010011 ekstrak dengan perseninhibisi diatas 50% (ABTS)

ANTIOKSDIAN73%IC50 0,07 μg/mL1,18 0,89 μg/mLIC50 11,0IC50 17,872,96 0,78%IC50 9,72(daun)48,59 0,97%52,45 0,66%44,42 0,94%96,4 15,2μmol/ g fw3,75 0,16 μmol/ gfw

DaunPareMaserasi (n-heksana,metilen klorida, etilasetat, tMonitoring KLT denganeluen kloroform 100%

Ekstrak n-heksanaDaunPareEkstrak metilenkloridaEkstrak etil asetatEkstrak metanolDiuji dengan ABTSDATA

Penghambatan ABTS80Penghambatan (%)70Ekstrak Etil asetat: 70,30 0,02%Ekstrak Metanol: 67,15 0,03%,Ekstrak metilen klorida: 37,22 0,03%Ekstrak n-heksana: 33,11 0,03%.6050403020100MeOHEAMCHx100806040IC50 115,54 µg/mL(Etil asetat)20Penghambatan (%)Penghambatan (%)100806040IC50 27,58 µg/mL(Metanol)20000100200Konsentrasi μg/mL300400050100Konsentrasi μg/mL150200

SampelDaun ParedikeringkanSample kering900 gMaserasi3x 24 jamEkstrak pekat(97,49 g)EvaporasiFiltratResidu

EkstrakPekat Pare(50 g)Fraksinasi(KCV)MonitoringKLTFraksi T(3,169 g)Fraksi P(1,774 g)Fraksi R(9,386 g)Fraksi Q(1,925 g)KCV Tahap ke-2Fraksi S(17,937 g)

KCV Tahap ke-2Fraksi R9,368 gRefraksinasi(KCV)MonitoringKLTFraksi R1(0,485 g)Fraksi R2(1,779 g)Fraksi R3(0,339 g)Fraksi R4(0,623 g)Fraksi R5(0,825 g)KCV Tahap ke-3Fraksi R6(4,754 g)

KCV Tahap ke-3Fraksi R6(4,754 g)Refraksinasi(KCV)MonitoringKLTFraksi R6a(185 mg)Fraksi R6b(638 mg)Fraksi R6c(56 mg)Rekristalisasi

Uji Kemurnian Senyawa R6b (486 mg)1KLT 3 EluenKLT 2 Dd2 Uji Titik Leleh(128 C- 129 C)bKeterangan 3 Eluen:a. Etil asetat: n-heksana 95%b. Etil asetat: Metilen klorida 60%c. Metanol: n-heksana 5%d. Etil asetat: n-heksana 50%

1IR Senyawa R6b3412 cm-1 (OH)Alkohol2877 cm-1 dan 2949cm-1 (C-H sp3)1707 cm-1 (C O)1381 cm-1 (C-O)1641 cm-1 (C C)

2Data 1H-NMR Senyawa R6bδH (ppm)Compound R6bHO9,88 (1H, s)3,55 (1H, brs)OH4,00 (1H, d)34.42 (1H, dt)5,91 (1H, d, J 5Hz)HHH5,16 (1H, d, J 10Hz)H

3δC (ppm)Compound 95H2HCHCData 13C-NMR Senyawa R6b

PosisiSenyawa R6δH (ppm)δC (ppm)Momordicine IδH (ppm)δC (ppm)1.22,222,22.30,230,33.3,55 (1H, brs)77,03,55 (1H, brs)77,14.42,242,35.147,3147,36.123,9124,05,91 (1H, d, J 5Hz)7.4,00 (1H, d,2,40 (1H, m)66,810.4,00 (1H, d,2,58 (1H, d,66,950,82,40 (1H, m)37,750,852,12,58 (1H, m)37,7J 10 35,635,616.28,628,617.51,251,318.15,315,319.9,88 (1H, s)19 11OHC19102J 5,2 Hz)52,09.12J 4 Hz)J 5Hz)8.5,91(1H, d,18209,79,88 (1H, 1

PosisSenyawa R6Momordicine IδH (ppm)δC (ppm)δH (ppm)δC (ppm)20.1,96 (1H, m)33,71,98 (1H, m)33,721.1,00 (3H, d,19,21,00 (3H, d,19,3iJ 5 Hz)J 6,4 Hz)22.45,545,623.66,566,64,42 (1H,dt, J 104,41 (1H, dt,1812J 8,8 Hz)Hz)24.5,16 (1H, d,2133,4J 10 Hz)5,16 (1H, d,133,453130,526.1,70 (s)18,71,70 (3H, s)18,827.1,67 (s)26,01,68 (3H, 17OH2613161415874HOJ 8,8 Hz)130,425.19 5,24-dien-19-al(Momordicine I)Momordicine I telah dilaporkan sebelumnya dari ekstrak etanol daun Pare(Bing et al., 2008), (Li et al., 2015) dan ekstrak metanol (Ma et al., 2010)

ISOLASI SENYAWA R5dFraksi R5(0,825 g)Refraksinasi(KCV)MonitoringKLTFraksi R5a(208,6 mg)Fraksi R5b(151,2 mg)Fraksi R5c(109 mg)Fraksi R5d(450,2 mg)KKGFraksi R5e(201,3 mg)

Fraksi R5d(450,2 yawa R5d(40 mg)

Uji Kemurnian Senyawa R5d (40 mg)1KLT 3 EluenKLT 2 D2dbKeterangan 3 Eluen:a. Metanol: Metilen klorida 5%b. Etil asetat: Metilen klorida 40%c. Etil asetat: n-heksana 95%d. Etil asetat: n-heksana 50%Uji Titik Leleh(160-161 C)

1IR Senyawa R5d3381 cm-1 dan 3574cm-1(OH) Alkohol2877 cm-1 dan 2937cm-1 (C-H sp3)1705cm-1 (C O)1462 cm-1 (C-O)1618 cm-1 (C C)

13CNMR (δC, 3018,018,131219 11OHC191054HO62829232517OH26161471530OH27201382422

13CNMR (δC, 4,835,53018,018,1250,050,23OCH31219 11OHC19105622231530OH2526161427OCH31374HO201782422

13CNMR (δC, 5,53018,018,1250,050,23OCH3181219 2221

Posisi C C-NMRHMQCHMBC376,23,5521,3 (C-1) , 145,5 (C-5)766,22,5150,0 (C-8),21,33 (C-1), 123,9 (C-6), 145,5 (C-5)2575,0-6123,95,8936,7 (C-10), 41,5 (C-4), 47,6 (C-17), 66,2 (C-7)23128,45,47136,9 (C-24), 39,49 (C-22), 75,0 (C-25)24136,95,39 ; 5,36128,4 (C-23), 25,5 (C-26), 39,4 (C-22), 75,0 (C-25)5145,5-850,01,47950,3-1036,72,5150,0 (C-8), 21,3(C-1), 123,9 (C-6), 145,5(C-5)1447,92,0634,8(C-20), 45,4(C-13), 47,6(C-17)2239,42,16 ; 1,7636,2 (C-15) ,18,9(C-21) ,136,9(C-24)1536,21,552034,81,47 ; 1,5045,5 (C-13) , 47,6 (C-17) 27,5(C-16)1229,11,67 ; 1,6615,0(C-18), 23,5(C-11)228,51,60 ; 1,631627,51,36 ; 1,3445,4 (C-13) ,18,04(C-30) 27,5 (C-16)45,4(C-13), 47,6 (C-17), 50,0 (C-8)2,5121,3H50,03,55 HHO145,5123,9OH

Posisi C C-NMRHMQCHMBC376,23,5521,3 (C-1) , 145,5 (C-5)766,22,5150,0 (C-8),21,33 (C-1), 123,9 (C-6), 145,5 (C-5)2575,0-6123,9 5,8936,7 (C-10), 41,5 (C-4), 47,6 (C-17), 66,2 (C-7)23128,45,47136,9 (C-24), 39,49 (C-22), 75,0 (C-25)24136,95,39 ; 5,36128,4 (C-23), 25,5 (C-26), 39,4 (C-22), 75,0 (C-25)5145,5-850,01,47950,3-1036,72,5150,0 (C-8), 21,3(C-1), 123,9 (C-6), 145,5(C-5)1447,92,0634,8(C-20), 45,4(C-13), 47,6(C-17)2239,42,16 ; 1,7636,2 (C-15) ,18,9(C-21) ,136,9(C-24)1536,21,552034,81,47 ; 1,5045,5 (C-13) , 47,6 (C-17) 27,5(C-16)1229,11,67 ; 1,6615,0(C-18), 23,5(C-11)228,51,60 ; 1,631627,51,36 ; 1,3445,4 (C-13) ,18,04(C-30) 27,5 (C-16)36,7H45,4(C-13), 47,6 (C-17), 50,0 (C-8)HO50,066,241,5145,5OHH 2,51H 5,89

Posisi C C-NMRHMQCHMBC376,23,5521,3 (C-1) , 145,5 (C-5)766,22,5150,0 (C-8),21,33 (C-1), 123,9 (C-6), 145,5 (C-5)2575,0-6123,95,8936,7 (C-10), 41,5 (C-4), 47,6 (C-17), 66,2 (C-7)23128,4 5,47136,9 (C-24), 39,49 (C-22), 75,0 (C-25)24136,9 5,39 ; 5,36 128,4 (C-23), 25,5 (C-26), 39,4 (C-22), 75,0 (C-25)5145,5-850,01,47950,3-1036,72,5150,0 (C-8), 21,3(C-1), 123,9 (C-6), 145,5(C-5)1447,92,0634,8(C-20), 45,4(C-13), 47,6(C-17)2239,42,16 ; 1,7636,2 (C-15) ,18,9(C-21) ,136,9(C-24)1536,21,552034,81,47 ; 1,5045,5 (C-13) , 47,6 (C-17) 27,5(C-16)1229,11,67 ; 1,6615,0(C-18), 23,5(C-11)228,51,60 ; 1,631627,51,36 ; 1,3445,4 (C-13) ,18,04(C-30) 27,5 (C-16)H 5,4739,445,4(C-13), 47,6 (C-17), 50,0 (C-8)136,9128,4H 5 36,75,0 OCH3 3,13

Posisi C C-NMRHMQCHMBC2927,11,0441,5(C-4), 145,5(C-5), 26,2(C-27)1123,51,55 ; 2,2529,1(C-12)2118,90,8936,2(C-15), 39,4(C-22)3018,00,7245,4 (C-13) 47,6 (C-17) 34,8(C-20)1815,00,8747,6(C-17), 45,4(C-13), 50,0(C-8)19208,09,7423128,4 5,47136,9 (C-24), 39,49 (C-22), 75,0 (C-25)24136,9 5,39 ; 5,36128,4 (C-23), 25,5 (C-26), 39,4 (C-22), 75,0 (C-25)50,075,0 (C-25)OCH33,13H 5,4739,4136,9128,4H 5 36,75,0 OCH3 3,13

HHOCH3OHHHHOOHHHSenyawa R5d -al)Telah diisolasi pertama kali dari ekstrak metanol daun pare (Fatope etal., 1990), (Jiang et al., 2016), ekstrak campuran n-heksana, klorofomdan metanol (Mulholland et al., 1997),

ABTSDPPH

100Penghambatan (%)8060Fraksi R: 21,12 0,02%Senyawa R6b: 5,51 0,02%IC50 asam galat: 2,24 μg/mL40200Fraksi RMomordicine I (R6b)Asam GalatPenghambatan (%)100Fraksi R: 40,28 0,04%Senyawa R6b: 36,76 0,03%IC50 asam galat: 1,36 μg/mL806040200Fraksi RMomordicine I (R6b)Asam Galat

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

PENDAHULUANKESIMPULANMETODE DANPEMBAHASAN

Ekstrak Metanol Daun Pare(IC50 27,58 ABTS)Fraksi R(21,12 0,02% DPPH) dan (40,28 0,04% ABTS)(36,76 0,04% ABTS)OCH3(5,51 0,02% i-kukurbita-5-23-dien-19-al (40 mg)Momordicine I (489 mg)

Prof. Dr. Taslim Ersam, M.SSri Fatmawati, M.Sc., Ph.D.Dosen PembimbingProf. Mardi Santoso, Ph.D.Ketua SidangSuprapto, M.Si., Ph.D.PengujiRatna Ediati, M.S., Ph.D.PengujiPak Edi PurwodadiIdentifikasi TanamanProf. Yana M. Syah (ITB)Elvira Hermawati, M.Si (ITB)(Uji NMR)Erfan RofiantoUji IR

Penghambatan DPPHPenghambatan (%)807060Ekstrak Etil asetat: 65,65 0,02%Ekstrak Metanol: 40,57 0,06%,Ekstrak metilen klorida: 39,48 0,05%Ekstrak n-heksana: 25,07 0,1%.50403020100MeOHEAMCHxPenghambatan (%)1008060IC50 ekstrak etil asetat 211 μg/mL40200050100150200250Konsentrasi µg/mL300350

ALATGelas piala, gelas kimia, hotplate stirrer, magnetic stirrer, pengaduk,erlenmeyer, kaca arloji, pipet tetes, pipa kapiler, gelas ukur, botol vial,pinset, chamber, kertas saring, tabung steril, peralatan sokletasi, pH meter,peralatan kromatografi cair vakum (KCV), rotary evaporator Eyela N-1001,alat ukur titik leleh Fisher John, lampu UV (λ 254 dan 365 nm),spektrometer FT-IR Shimadzu, spektrometer 1H-NMR dan 13C-NMR JEOL.BAHANSampel kering, silika gel 60 G, plat KLT alumunium silika gel 60 GF254(KLT), larutan penampak noda 1,5 % serium sulfat dalam H2SO4, H2SO4 2N, akuades, n-heksan teknis, etil asetat teknis (EtOAc), metanol teknis(MeOH), diklorometana teknis (CH2Cl2), serta pelarut pro analitik antaralain metanol dan kloroform (CHCl3).

SNSO3HNNNOHSHO3SHO OHOHOHOHOOOHOOHOHHOOOHOOHOOHOHOOOHOOHOOHOHOOHOH

y 11.602ln(x) 5.5567R² 0.9985100Penghambatan (%)806040200050100Konsemtrasi μg/mLEkstrak metanol ABTS150200

tradisional Bali yang sumbernya berasal dari Lontar Lontar Rukmini Tatwa . 13 Tanaman Obat Tradisional Bali . Lontar Rukmini Tatwa Keanekaragaman Tanaman Obat Bali . Wawancara Masyarakat Bali Utara DAUN PARE . Kubola (2008) e